产品介绍

DNA合成简介

Oligo DNA的人工化学合成始于50年代初期，1980年，全自动的固相DNA合成仪面市后，使得快速、高效合成Oligo DNA成为可能，这极大地推动了生物工程技术的蓬勃发展。随着生物工程技术发展，人工合成Oligo DNA的需求量越来越大，已经成为分子生物学实验中最基础的试剂之一。而合成Oligo DNA的质量，将会直接影响科研人员实验计划的顺利进行。因此， 使用高质量的合成Oligo DNA制品变得尤为重要。

我公司合成Oligo DNA制品有如下特点：

1、高质量合成。使用进口试剂，合成高质量的DNA制品。

2、高纯度纯化。推出脱盐纯化、PAGE纯化、HPLC纯化三种级别制品，客户可根据实验需要选择。我们保证对每个制品都进行严格的质量管理。

3、完善的数据。制品包装中附有制品相关的多种数据，包括：合成的原始数据，A、G、C、T各碱基的分布情况，分子量，OD数，nmol数等，使用方便。

DNA合成的原理

现在一般都采用亚磷酰胺化学合成Oligo DN**段，具有高效、快速偶联以及起始反应物比较稳定的特点。该方法是在固相载体上完成DNA链的合成的，合成时从3"→5"方向进行，通常3"端的第一个碱基结合在Glass担体（Controlled Pore Glass，CPG）上。Oligo DNA合成的原理基本相同，主要差别在于合成产率的高低、试剂消耗量和单个循环用时的不同。我公司采用的合成仪主要机型为ABI3900高通量合成仪。

合成的详细过程见图1，现简要说明如下：

第一步 三***和预先连接在固相载体（CPG）上的第一个核苷酸反应（其活性基团处于被保护状态），脱去核苷酸5‘-羟基的保护基团DMT，获得游离的5‘-羟基；

第二步 活化新的碱基单体（Phosphoramidite)，准备与第一个碱基进行反应；

第三步 合成DNA的原料（亚磷酰胺保护的核苷酸单体）与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的3‘端被活化，5‘-羟基仍然被DMT保护，与溶液中游离的5‘-羟基发生缩合反应；

第四步 带帽(capping)反应，缩合反应中可能有极少数5‘-羟基没有参加反应(少于2%)，用乙酸酐和1-甲基咪唑终止其后继续发生反应，这种短片段可以在纯化时分离掉；

第五步 在氧化剂碘的作用下，亚磷酰形式转变为更稳定的磷酸三酯。（即将三价磷氧化成五价磷) （重复进行Step1～Step5的循环，直至合成完所需的Oligo DNA序列）

第六步 合成结束后，将Oligo DNA分子从CPG上切下，再进行进一步的纯化。

合成过程中可以观察TCA处理阶段的颜色判定合成效率。连接在CPG上的引物被切下来，通过, PAGE等手段纯化引物，成品引物用C18浓缩、脱盐，测定OD260定量，根据定单要求分装。

DNA合成项目表