DNA测序服务
产品介绍
1、测序仪:美国ABI公司 3730XL型
2、服务特色
i 速度快::收到样品后两个工作日内出结果,为您赢得宝贵时间。
ii 质量优:: 单个反应读取序列长度在800bp以上,不仅能为您提供高质量的测序报告,还能为您提供免费拼接序列、免费设计引物的超值服务。
iii 收费合理:在充分保证质量的前提下,桑尼以物超所值的收费标准为您服务。
3、测序收样注意事项
i 样品为菌株
1)不论是通用载体还是自己构建的载体,送样时请您务必注明培养基类型、抗生素类型、载体名称、测序引物。
2)对于特殊抗性、特殊培养条件的样品,建议您提供已经培养好的5ml菌液或沉淀好的菌体。
3)提供至少200ul的新鲜菌液,加甘油后冷冻保存的菌株请复苏后再提供。若样品太少会导致培养时间过长甚至出现培养细菌失败,以至延误您的实验。
4)我公司提供Amp,Kan,Cm,Tc四种抗生素,其它抗生素类型请注明原液浓度及工作浓度随样品一起备齐。
ii 样品为质粒
1) 为确保测序的成功率和质量,建议您尽量提供菌种测序。
2) 因特殊原因只能提供质粒模板测序时,必须保证质粒是高纯度的,而且须溶解在灭菌的去离子水中,而不是TE溶液或其它含有盐的溶液中。浓度大于100ng/ul,体积10ul以上。注明质粒抽提方法。
3) 如果是病毒(包括噬菌体)DNA、低拷贝质粒以及BAC DNA,请您纯化好模板,我们将直接用于测序。
4)插入片段有特殊结构时必须注明,特别是含有通用引物的同源序列。
iii 样品为PCR产物
1)原则上收取高质量的PCR原液,片段大小为200-1500bp。取2-3ul原液电泳检测应为明亮单一条带。
2)注明提供PCR产物的体积、片段大小、浓度,是否经过Agarose胶纯化。未纯化PCR产物体积不少于50ul,已纯化PCR产物体积不少于10ul。
3)注明PCR测序引物的序列、浓度、体积以及纯化方式。引物浓度不低于5pmol/ul,要求PAGE纯化,体积10ul以上。
4)如果PCR产物纯化由您自己完成,纯化后的PCR产物要溶在灭菌的去离子水中,不能溶于TE中。
优势
1、 拥有先进的实验设备及完善的实验流程,丰富的测序团队管理经验。
2、 专业的测序团队,积累了丰富的实战经验:
个性化实验方案:
A: GC rich、重复结构模板
B: poly结构、发卡结构模板
C: 16sRNA样品
D: pET系列样品
3、 更人性化的取样方案:
A: 销售代表取样,更详尽了解您的需求
B: 周末照常取样,送样,加快您的实验进度
4、 严格的保密制度,保护客户样品的安全性。
样本要求
提供样品时请注意:
1、菌液
如果提供菌液来测序,请提供0.5ml以上的新鲜菌液,我们会为您培养并免费抽提质粒。 若您的菌株需要特殊培养条件,或为噬菌体,您最好提供5ml新摇菌液的沉淀菌体,将沉淀菌体装在离心管中,用封口膜封好后交给我们的工作人员或邮寄给我们。这样我们可以直接抽提质粒进行测序。
2、质粒
如果您提供质粒来测序,请用质量较好的试剂盒抽提,以保证质粒的纯度可以达到全自动荧光测序的要求。提供质粒测序时,要求:浓度>100ng/微升,体积在10微升以上(对于每个样品只测一个反应的情况)。如果每个样品需测几个反应,则送样时需相应提高样品的量。请将质粒溶解在ddH2O中(请勿溶解在TE溶液中)。
注:无论您提供菌液或质粒,请您务必写明载体的名称、插入片段的大小和位置、选用的测序引物名称或序列,并且尽可能的标明测序引物距离插入片段的位置(请您注意测序引物及引物后会有20-50个碱基不能准确读出)。如果提供特殊测序引物,请一定写明引物浓度和序列,并且一定要提供高纯度的引物,浓度要大于5pmol/ul。
3、PCR产物
如果您提供PCR产物原液来测序,请确信PCR产物为单一扩增条带,片段大小在150—2000bp之间,且体积≥50ul,浓度≥50ng/ul。DNA总量必须大于2微克,由我们进行琼脂糖凝胶电泳割胶纯化,然后再来测序。小于150bp和大于2Kb的DN**段请克隆后再测序。
如果您提供已经纯化后的PCR产物来测序,请您一定进行Agarose凝胶电泳纯化,然后用质量较好的试剂盒回收,将回收的DNA溶解在灭菌过的去离子水中(请不要溶解在TE中),并确信PCR产物为单一扩增条带。要求:浓度>50ng/微升,提供10微升以上(对于每个样品只测一个反应的情况)。如果每个样品需测几个反应,则送样时需相应提高样品的量。同时提供PCR引物,准确标明引物浓度,浓度要求大于5pmol/ul,并确信是高纯度的引物。
由于PCR产物测序相对较难,为得到较好的测序结果,送样时请尽量满足上述要求。

